Edward M. Cazán-Noz 1, 3 Sergio A. Gómez-Cornelio 2, 4 Susana De la Rosa-García 1, 5 Benjamín O. Ortega-Morales 1, 6 Departamento de Microbiología Ambiental y Biotecnología, Universidad Autónoma de Campeche, Av. Agustín Melgar s/n, Campeche, Campeche 24039, México. 2 El Colegio de la Frontera Sur, Av. Rancho polígono 2A, Parque Industrial Lerma, C.P. 24500 Campeche, México.
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La celulosa es el compuesto orgánico más abundante en el planeta. Los hongos son uno de los principales degradadores de sustratos celulósicos y su potencial es atractivo en áreas de investigación para ser aplicados en la industria, de los alimentos, textiles, papel, tratamiento de aguas residuales, bioconversión de biomasa lignocelulosica en biocombustibles entre otras. Los hongos epilíticos se encuentran adheridos a diversos sustratos rocosos y son capaces de soportar condiciones ambientales extremas (temperatura y desecación), así como la baja concentración de nutrientes, por lo que las cepas aisladas en estas condiciones pueden presentar actividad celulolítica. El objetivo de este trabajo, es el de encontrar nuevos géneros y especies fúngicas, aislados sustratos no convencionales, para actividad celulolítica.
En este estudio se determinó el potencial celulolítico de 101 especies fúngicas epilíticas aisladas de “biofilms” de rocas calcáreas de las cuales se escogieron las 12 mejores (Figura 1 y 2). A
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Figura 2. Placas de Agar CMC – Rojo Congo de las especies con mayor actividad celulolítica. A. Control, B. Chaetasbolisia falcata, C. Sepedonium microspermum, D. Phoma sp. II, E. Nalanthamala madreeya, F. Sarocladium kiliense, G. Myrothecium sp., H. Scolecobasidium constrictum, I. Acremonium rutilum, J. Stachybotrys renispora, K. Arxiella terrestris, L. Pestalotiopsis maculans, M. Echinocatena sp.
Inoculación en caldo CMC
Screening de Actividad Celulolítica Aislamiento e Identificación de Hongos.
Producción de celulasas (µmol/ml/min) Día 3 Día 7 56 Chaetasbolisia falcata (V.A.M. Mill. & Bonar) 0.6 ± 0.1 1.0 ± 0.1 150 Sepedonium microspermum (Besl) 1.4 ± 0.1 2.2 ± 0.1 240 Phoma sp. II (Sacc.) 0.8 ± 0.1 1.4 ± 0.1 357 Nalanthamala madreeya (Subram.) 1.5 ± 0.1 2.6 ± 0.1 410 Sarocladium kiliense (Grütz) Summerb. 1.4 ± 0.1 2.3 ± 0.1 429 Myrothecium sp. (Tode) 0.8 ± 0.1 1.3 ± 0.1 562 Scolecobasidium constrictum (E.V. Abbott) 0.6 ± 0.1 1.2 ± 0.1 688 Acremonium rutilum (W. Gams) 1.1 ± 0.1 1.5 ± 0.1 748 Stachybotrys renispora (P.C. Misra) 1.3 ± 0.1 2.0 ± 0.1 751 Arxiella terrestris (Papendorf) 0.8 ± 0.1 1.5 ± 0.1 756 Pestalotiopsis maculans (Corda) Nag Raj 1.8 ± 0.1 2.8 ± 0.1 841 Echinocatena sp. (R. Campb. & B. Sutton) 1.2 ± 0.1 1.8 ± 0.1
Clave
Prueba cuantitativa
Prueba DNSa Los días 3 y 7
Orbitación por 7 días continuos a 140 rpm
Placas con CMC Agar – Rojo Congo 1%
Figura 3. Resultados de la prueba DNSa, en las tomas de muestra del tercer y séptimo día de incubación.
Lavado y filtrado a través de microtamices
Durante cada marcha metodológica se realizaron las pruebas por triplicado con tal de disminuir errores.
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Todas la cepas fueron capaces de crecer en CMC pero solo 65 especies (64.0%) fueron productores de celulasas al revelarse el medio CMC con rojo Congo.
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Las cepas con mayor actividad fueron Pestalotiopsis maculans (Corda) Nag Raj; Nalanthamala madreeya Subram., Sarocladium kiliense (Grütz) Summerb.; y Stachybotrys renispora (P.C. Misra), que presentaron halos entre 11 - 8 mm, cuantitativamente la concentración de glucosa detectada, usando DNSa fue entre 2.0 – 2.8 ± 0.1 µmol/ml/min en cultivos de 168 horas.
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El alto porcentaje de especies degradadoras de celulosa, sugiere que el sustrato rocoso es una alternativa en la búsqueda de hongos con alto potencial celulolítico.
Figura 1. Curva de calibración para la prueba de DNSa.
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Nombre del Microorganismo
Stachybotrys renispora: Foto de Edward Cazán
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