Análise de Resíduos de Pesticidas em Tomate para Indústria

Jornadas Técnicas Salvaterra de Magos

Análise de Resíduos de Pesticidas em Tomate para Indústria

Cláudia Santinho

19 de Maio de 2004

Análise de Resíduos de Pesticidas  Os consumidores preocupam-se com a presença de resíduos de pesticidas nos alimentos: interesse cada vez maior em produtos de agricultura biológica e/ou protecção integrada  Métodos de análise: químicos ou imunológicos  As análises químicas (Cromatografia Gasosa ou Líquida) são muito úteis, pois permitem confirmar que os produtos agrícolas não contêm resíduos de pesticidas acima dos Limites Máximos de Resíduos (LMRs)  Ensaios imunológicos de fácil aplicação que podem ser usados como métodos de rastreio

Ensaios Imunológicos  Baseiam-se nas interacções estabelecidas entre a substância a analisar (pesticida) e um anticorpo

 Podem ser utilizados em análise de resíduos em água, solo, alimentos  Vantagens em relação às técnicas instrumentais: baixo custo da análise por amostra, sensibilidade e selectividade elevadas  Reacções Cruzadas permitem identificar grupos pesticidas com características químicas semelhantes

de

 Analisaram-se amostras de tomate para indústria (cv. ‘Perfect Peel’) colhidas em campos experimentais das zonas de Vila Franca de Xira e Coruche (Estação Experimental António Teixeira – INIAP).

Pesticidas Analisados em Amostras de Tomate

Clorpirifos

Clorpirifos-metilo

Insecticidas Organofosforados Utilizados para a lagarta do tomate LMR: 500 ppb Intervalo de Segurança: 1 semana para o clorpirifos-metilo; 2 semanas para clorpirifos

‘Kit’ de Clorpirifos (Limite de Detecção: ~ 0.10 ppb)

Pesticidas Analisados em Amostras de Tomate

Metalaxil Fungicida Fenilamida (tipo Acilalanina) Utilizado no combate ao Míldio LMR: 200 ppb Intervalo de Segurança: 3 dias quando a produção se destina a consumo em fresco; 4 semanas para fins industriais

‘Kit’ de Metolacloro (Limite de Detecção: ~ 0.05 ppb)

‘Kit’ de Ensaios Imunológicos para o Metolacloro Conjugado Enzimático: metolacloro marcado com uma enzima Partículas Magnéticas: anticorpos associados a partículas magnéticas

Solução Colorimétrica: peróxido de hidrogénio e cromogénio Solução de Paragem: Ácido Sulfúrico Diluente/Padrão Zero: 0 ppb de metolacloro

Padrões de Metolacloro: 0.1 ppb, 1.0 ppb, 5.0 ppb; controlo (3.0 ppb)

‘Suporte de Separação Magnética’

O metolacloro do conjugado enzimático compete com o metalaxil da amostra para os locais de ligação do anticorpo

Cor inversamente proporcional à concentração da substância a analisar

Preparação das Amostras de Tomate

Evaporação à secura dos extractos de tomate

Tomate cv. Perfect Peel (congelado)

Homogeneização da amostra no UltraTurrax

Dissolução do resíduo seco

Extractos em acetona obtidos por filtração

Realização do Ensaio Imunológico para Detecção de Resíduos de Metalaxil Conjugado Enzimático

Padrões Controlo

Partículas Magnéticas

Amostras

(30 min. temp. amb.)

Separação Magnética (2 min.)

Adição da Solução de Lavagem

Adição de Solução Colorimétrica

Realização do Ensaio Imunológico para Detecção de Resíduos de Metalaxil

Adição de Solução de Paragem

20 min.

Espectrofotómetro

( = 450 nm)

Padrões de Metolacloro:

Pd1- 0.1 ppb; Pd2- 1 ppb; Pd3- 5 ppb Am. 52

Am. 51

Am. 50

Am. 49

Am. 48

Am. 47

Am. 46

Am. 45

Am. 40

Am. 39

Am. 38

Am. 37

Am. 36

Am. 35

Am. 34

Am. 33

Am. 19B

Am. 19A

Am. 15B

Am. 15A

Am. 13B

Am. 13A

Am. 7B

Am. 7A

Am. 1B

Am. 1A

Controlo

Pd 3

Pd 2

Pd 1

Pd 0

Absorvância média

Resultados obtidos com o ‘Kit’ de Metolacloro 1.6

1.4

1.2

1

0.8

Absorvâncias médias dos padrões e amostras

0.6

0.4

0.2

0

LMR para o Metalaxil: 200 ppb

Resultados obtidos com o ‘Kit’ de Clorpirifos 1.4

Absorvância média

1.2

Absorvâncias médias dos padrões e amostras

1 0.8 0.6 0.4 0.2

Padrões de Clorpirifos: Pd1- 0.22 ppb; Pd2- 1 ppb; Pd3- 3 ppb

Am. 24

Am. 23

Am. 22

Am. 21

Am. 20

Am. 19

Am. 18

Am. 17

Am. 12

Am. 11

Am. 9

Am.10

Am. 8

Am. 7

Am. 6

Am. 5

Am. 19A

Am. 19B

Am. 15B

Am. 15A

Am. 13B

Am. 7B

Am. 13A

Am. 7A

Am. 1B

Am. 1A

controlo

pd3

pd2

pd1

pd0

0

LMR para o Clorpirifos e Clorpirifos-metilo: 500 ppb

Conclusões  Absorvâncias superiores às obtidas para os padrões usados indicam que o tomate não apresenta resíduos de pesticidas (Clorpirifos, Clorpirifos-metilo, Metalaxil)  O tomate analisado é adequado para o consumo  Os ensaios imunológicos são uma boa opção para avaliar a segurança de produtos alimentares, pois permitem analisar muitas amostras em simultâneo  Se necessário, apenas os resultados positivos serão confirmados por análise instrumental, o que torna o processo analítico mais rápido e menos dispendioso