Cósmidos

May 29, 2017 | Autor: Ricardo Kosonoy | Categoria: Genetics, Biotechnology, UPSIN
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Descrição do Produto

Electroporación: método físico en el que una solución con células y DNA recombinante es sometido a descargas eléctricas de alto voltaje lo que altera la permeabilidad de la membrana permitiendo el paso del DNA.
Trasnfección método físico activo de gran eficacia donde el vector es un virus el virus introduce el DNA recombinante mediante el mecanismo normal de infección viral.
Microproyección o biobalística: método físico en el que se utiliza una micrópistola que dispara microbalas de acero en las que va impregnado el DNA. Se utiliza en cultivos celulares o in vivo sobre órganos como la piel, hojas etc.
Mecanismos de insercción
Transformación: se le hace un tratamiento físico-químico a la bacteria lo que hace que la permeabilidad de la membrana de la célula huésped varíe en ese momento, se dice que la célula es compentente ya que puede penetrar los DNA recombinantes en el interior de la célula.
Microinyección: método físico en el que se introduce el DNA recombinante en el interior de una célula con una micropipeta.
Lipoefacción: el DNA recombinante se introduce en liposomas, que son pequeñas vesículas fosfolipídicas estos liposomas se une n con la membrana celular y el DNA contenido en su interior se introduce en la célula.




Características de los cosmidos
Son vectores híbridos construidos utilizando partes del fago lambda y plásmidos.
Cósmidos pueden contener 37-52 kb de ADN.
Contienen una secuencia "cos" del fago lambda.
un origen de replicación de plásmido
contiene cuatro sitios de restricción para la clonación (BamHI, EcoRI, ClaI y Hindlll)
puede replicarse en la célula como plásmido o se empaquetado como en el fago

Fago λ o bacteriófago λ es un virus bacteriófago
Los plásmidos son moléculas de ADN extracromosómico circular que se replican y transmiten independientes del ADN cromosómico.
Origen Del Vector
Son vectores de clonación, que han sido ampliamente usados en la elaboración de genotecas de DNA genómicos de gran tamaño, ya que permiten la introducción de insertos de DNA de hasta 45 kb.

Constan de una molécula de DNA de 5kb que lleva genes de resistencia a antibióticos, el origen de replicación de un plásmido bacteriano, los extremos cos del DNA del fago λ y sitios únicos de restricción para la inserción del DNA a clonar.
Cósmidos
Cósmidos
Integrantes: M.C Iliana Zazueta.
Kosonoy Ricardo
Conclusion
Los cósmidos son un tipo de vector para transportar un segmento de AND
Son llamados así por su principal característica, el tener la secuencia "cos"del fago lambda
Una vez en la célula huésped, se replica como un plásmido
Resiste uno o más antibióticos



Aplicaciones
Muchos genes eucarióticos tienen más de 1,000 kb por lo que deben ser clonados como un conjunto de fragmentos parcialmente superpuestos para esto pueden utilizarse cósmidos.
Para hacer una genoteca con estos vectores el DNA se corta con enzimas de restricción de manera que deja fragmentos de tamaño apropiado. El cósmido se empaqueta in vitro en fagos que se utlizan para infectar E. coli, una vez dentro de la célula el cósmido se replica y puede recuperarse de la célula como un plásmido.
9/28/2016


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